Тағамдық аурулардың жақында өршуі және Ауруларды бақылау және алдын алу орталығының немесе CDC-тің тағамдық ауруларға қатысты жаңа бағалаулары азық-түлік қауіпсіздігі туралы заң жобасының S.510 жақында қабылдануына түрткі болған болуы мүмкін. Осы заңнаманың бөлігі ретінде FDA ең қауіпті жемістер мен көкөністерді өндірушілер үшін жаңа өнім қауіпсіздігі ережелерін жасауды талап етеді. Қауіпсіз азық-түлікке деген өзектіліктің жоғарылауы азық-түлік өсірушілері мен өңдеушілеріне азық-түлікті көзде немесе далада сынау мүмкіндіктерін қайта қарауға мәжбүр етеді.
БАР ТЕСТ ТЕХНОЛОГИЯЛАРЫ
Өсірушілер мен өңдеушілер бактерияларды сынау үшін тарихи үш әдістің бірін қолданды: аденозинтрифосфат (АТФ) тазалығын бақылау жүйелері, культуралық сынақ және полимеразды тізбекті реакция (ПТР) сынағы.
Аденозинтрифосфат тазалығын бақылау жүйелері барлық органикалық материалдарда кездесетін ATP молекуласын сынайды. ATP талдаулары жануарлар мен өсімдік жасушаларынан, сондай-ақ тірі немесе өлі бактериялардан, ашытқылардан немесе зеңдерден АТФ өлшейді. Бұл талдауды тазалықты анықтау үшін органикалық емес беттерде қолдануға болады және бактерияларды оң анықтау үшін жеткілікті ATP өндіру үшін 10,000 100,000 - XNUMX XNUMX бактерия болуы қажет.
Дақылдық талдау - берілген үлгіде қандай бактериялар немесе ашытқы болуы мүмкін екенін анықтайтын зертханалық сынақ. Мәдениет талдаулары бактериялардың бар болуын анықтау үшін өсу мүмкіндігін беру үшін үлгіні белгіленген уақытқа, әдетте 24-тен 48 сағатқа дейін инкубациялауды талап етеді. Бұл үлгіні зертханаға жіберуді талап етеді.
ПТР – әртүрлі бактериялар мен патогендерді сынау үшін ДНҚ қолданатын талдау. Процесс мыңдаған миллиондаған көшірмелерді тудыратын ДНҚ бөлігін күшейтеді. Бұл өте дәл және 12 сағаттан 26 сағатқа дейін уақытты алады.
ТҮГІН МӘСЕЛЕЛЕР
Қолданыстағы технологиялардың кемшіліктері бар, олар тамақ өнімдерін өндіруші мақсаттары үшін тиімсіз етеді және тиімсіз сынақтар тағамның ластануына, ауруға, табыстың жоғалуына және т.б. әкелуі мүмкін.
ATP талдаулары барлық органикалық материалда болатын ATP молекуласының болуын тексереді. Бұл оң ATP сынағы органикалық заттардың бар екенін растайтынын білдіреді - міндетті түрде бактериялар емес. Бұл талдау іс жүзінде тазалықты немесе беттің тірі немесе өлі органикалық материалдан тазалығын тексеру болып табылады. Ол органикалық материалды сынайтындықтан, тағам органикалық болғандықтан оны тағамға қолдануға болмайды. Сонымен қатар, ATP талдауы тірі бактерияларды жасыра алатын организмдердің жабысқақ жанама өнімі болып табылатын биофильмді анықтай алмайды. ATP сынауындағы тағы бір мәселе оң сынақ жасау үшін жеткілікті ATP өндіру болып табылады, бактериялар кем дегенде 10,000 XNUMX бактерияны қамтуы керек.
Жалпы мәдени талдаулар өте дәл, бірақ әдіс бактериялардың бар-жоғын тексеру үшін бактерияларды 24 сағаттан 48 сағатқа дейін инкубациялауды талап етеді. Бұл үлгі осы инкубациялық уақыт үшін зертханаға жіберілетінін және оқытылған техник сынақты оқитынын білдіреді. Зертханалық жұмыстың қажеттілігі соңғы пайдаланушының құнын арттырады және қосымша уақыт ластанған тағамның процесс арқылы сырғып кету мүмкіндігін арттырады.
ПТР талдаулары жоғары дәлдікпен жасалғанымен, өндірушіден үлгіні зертханаға жіберуді талап етеді, онда оқытылған техник сынақты өңдеу үшін қымбат жабдықты пайдаланады. Сынақтың өзі азық-түлік өндірушісіне түсетін шығындарды қосатын бірнеше күрделі қадамдардан тұрады. ПТР талдаулары 8 сағаттан 20 сағатқа дейін, сонымен қатар нақты сынақ үшін 1 сағаттан 4 сағатқа дейін созылатын байыту кезеңін қажет етеді. Қосымша қадамдар мен уақыт шығындарды арттырады және тағамның ластануы байқалмайды.
ФЕРМЕНТТЕРДІ ТЕСТІРУ
Микробиологтар 1950 жылдардың басынан бастап бактерияларды анықтауға арналған ферменттерді зерттеп, қолдана бастады. Көбісі 1970 және 1980 жылдары ферменттік әдістерді қолдануды тоқтатып, антиген/антидене немесе нуклеин қышқылын күшейту сынағы (NAAT) технологияларына ауысты. Осы уақыттан бері ферменттерді зерттеудің жалғасуы көптеген әртүрлі микроорганизмдермен байланысты арнайы бактериялық ферменттердің ашылуына әкелді. Бұл ақпарат арнайы бактериялар шығаратын арнайы ферменттерді анықтай алатын және байланыстыра алатын меншікті субстраттардың дамуына әкелді. Осы жаңа ақпараттық сынақтар ферментпен гидролизденген кезде флюорометрмен оқуға болатын флуоресценцияны тудыратын меншікті субстраттарды пайдалану үшін әзірленді.
Басқа диагностикалық жүйелер үлгіні культураларда өсіру немесе ПТР/NAAT жүйесін пайдаланып ДНҚ репликациялау арқылы бактерия жасушасының өзін табуы керек. Бұл әдістер, көп жағдайда, үлгіні алу сәтінен бастап нәтиже алу үшін бір күннен астам уақыт алады және олар оқытылған зертханашылар мен қымбат жабдықты қажет етеді. Ферменттерді анықтау әдістемесін пайдалана отырып, бактериялар ферменттің мыңдаған молекулаларын өндіре алады, бұл анықтаудың мүмкіндігін және уақытын кез келген басқа анықтау әдістеріне қарағанда әлдеқайда жылдамырақ арттырады.
БАКТЕРИЯЛЫҚ ФЕРМЕНТТЕРДІ АНЫҚТАУ ЖИНАҚТАРЫ
Осы әдістемені пайдалана отырып, қолмен жағындылар жинақтарымен немесе сандық қолмен тасымалданатын флюорометр жинақтарымен келетін бактериялық ферменттерді анықтау жинақтары жалпы организмдердің, грам теріс бактериялардың (Enterobacteriaceae) беттері мен тағамдарын сынау үшін далада пайдаланылуы мүмкін. Тесттер қалыпты фондық деңгейден жоғары бактериялардың болуын немесе жоқтығын 20 минут ішінде орнында нәтижелермен растайды. Сынақтарды орындау оңай, қосымша жабдықты қажет етпейді, сонымен қатар биофильмде жасырынған бактерияларды анықтайды. Дәлдік дәстүрлі әдістермен салыстырғанда бір сынақ жолағында 98-нан астам организм болса, 1,000 пайыздан жоғары. Жинақтар рұқсат етілмейтін бактериялық ластану деңгейін қамтитын «ыстық нүктелерді» іздеу үшін скрининг құралы ретінде қызмет етуге арналған. Олар арзан, жылдам және пайдалану оңай болғандықтан, бақылау мен тестілеуді жиірек орындауға болады.
АРТЫҚШЫЛЫҚТАРЫ
Ферменттік бактерияларды анықтау талдауларының стандартты культураға, ATP және ПТР талдауларына қарағанда көптеген артықшылықтары бар, соның ішінде жылдамырақ жылдамдық, пайдаланудың қарапайымдылығы, жоғары дәлдік, төмен баға және биофильмді анықтау мүмкіндігі. Ферменттік талдаулар үлгіден нәтижеге дейін 20 минуттан аз уақыт ішінде нәтиже береді және үлгілерді зертханаға жіберуді қажет етпейтіндіктен нәтижелер далада немесе сайтта қол жетімді. Мәдениет немесе ПТР талдаулары арнайы жабдықты және оқытылған техниктерді пайдаланады, бұл талдаулар жоқ болса, бұл оларды азық-түлік өсірушілер мен өңдеушілер үшін тиімді, арзан скрининг құралына айналдырады.
ҚОРЫТЫНДЫ
Қазіргі культура, ATP және ПТР талдаулары қымбат, баяу және ауыр. Далада бактерияларды анықтау үшін ферментті анықтауды пайдалану қауіпті бактериялық ластану деңгейін анықтаудың дәл, жылдам және арзан әдісін қамтамасыз етеді. Төмен құны бар скрининг құралының болуы пайдаланушылардың жиірек сынақтан өткізе алатынын білдіреді, осылайша бактериялық ластану тұтынушыға жол таппай тұрып, оны ұстаудың сәтті жылдамдығын айтарлықтай арттырады.